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背景介紹

武漢巴菲爾生物技術服務有限公司在10年的發展歷程中,依托完備的實驗硬件設施和技術體系,我們的技術人員積累了豐富的實驗操作經驗,處理過非常多且復雜的各項技術服務,能為您提供專業的實驗設計服務和解決方案。巴菲爾放眼于全球生物醫藥前言技術轉化應用開發,立足于全國生物醫藥研發檢測合作及項目孵化,成果轉化。我們緊抓熱點,為廣大的科研工作者提供更多的優質服務,同時發展自己的特色項目:CRISPR/Cas9文庫篩選服務和多光譜成像技術。

CRISPR/Cas9文庫篩選服務

CRISPR/Cas9系統自從2011年被張鋒實驗室等進行改進和應用后,迅速在基因編輯領域占據了絕對的主導地位。2014 年,張鋒教授利用CRISPR 技術和二代測序,開發了針對人類全基因組的CRISPR 敲除文庫,并在腫瘤細胞系上利用該文庫進行了抗藥基因的篩選。在獲得陽性基因的基礎上,獲得了新的抗性基因,并且將相關研究發表在Science雜志上。

目前多篇CNS(Cell、Nature、Science)連續報道基于CRISPR/Cas9文庫的高通量篩選技術的應用,在NCBI上關于genome-scale CRISPR的文章現在已經有超過120 篇,并且主要集中于Nature、Science、Cell、PNSA等高分雜志及其主要子刊。利用該技術,研究人員在藥物靶標發現、基因功能研究、藥物敏感基因研究、病毒宿主研究等領域取得了巨大的成功。

巴菲爾生物緊跟科研前沿,已引進人類全基因組敲除文庫和人類全基因組激活文庫,并推出文庫慢病毒包裝、穩轉細胞株篩選、表型篩選、深度測序、生信分析等一系列服務,能幫您完成全部的文庫篩選相關實驗,分析獲得關鍵基因。

技術優勢

技術優勢

快速準確的找到與某種表型相關的基因

全基因組水平篩選,利于發現新靶點

假陽性率較低,靶點命中率高

應用范圍廣

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多光譜成像技術

多光譜成像技術,可俗稱免疫熒光多標,即將我們常見的免疫熒光雙標提高到六標,實現了在同一張組織切片上同時標記3~6種蛋白,解決了科研中經常遇到的標記蛋白種類太少,無法在同一張切片上觀察不同細胞或者多種蛋白分布情況的難題。那么多光譜成像技術是什么工作原理,同時又具有哪些更加強大的功能?

多光譜成像技術由多標染色、圖像采集和圖像分析三大模塊組成。多標染色采用的是Opal/TSA多標記免疫熒光技術,打破了常規免疫熒光技術的局限性,不受一抗的種屬來源限制,能夠在同一組織切片樣本上復染多達7種熒光標記(含DAPI在內)。圖像采集采用了Vectra全光譜圖像采集技術,這是最新一代的組織切片成像分析系統,創新性的將光譜成像和切片全景掃描功能完美融合,實現了革命性的技術跨越,通過光譜拆分能夠去除自發熒光的干擾,有效識別多重熒光信號,從而獲得高品質圖像,確保能夠進行精準的定量定位分析。

圖像分析方面,我們采用的是inForm自動圖像分析軟件,該軟件具有自學習功能,實現準確的智能組織劃分,而且輸出參數信息非常豐富,例如目標數目、位置、光譜拆分信號水平等。如果目標是細胞,輸出參數可以是單細胞多蛋白表達結果,與流式細胞儀所做分析類似。該軟件還可對染色區域面積進行計算分析,計算特定區域或者不同結構內的的陽性細胞數目、進行定量病理評分等。

傳統免疫熒光Opal/TSA多標記免疫熒光
靶點數目一般標記3種(含DAPI)最多可同時染色7種
一抗種類不同抗體必須是不同的種屬來源不受一抗來源限制,即不同抗體均來源于同一種屬(如兔抗)也可進行實驗
二抗種類熒光探針標記的二抗辣根過氧化物酶標記的二抗,不直接連接熒光標記
染色策略樣本抗原的空間位置的差異,需要設計復雜的染色策略。樣本/靶點的差異導致染色策略的差異,染色過程復雜、多變任何樣本無需任何染色策略,簡單的重復前一步的染色過程,樣本/靶點的差異不影響染色過程,使用簡單方便
染色效果亮度較弱,容易淬滅,各種抗體間存在互相影響,背景較高,對基于單細胞的定量分析不利高染色分辨率和染色特異性,信號強度強,淬滅時間更長,無背景影響,各靶點的信噪比大大提高,尤其適合組織基于單細胞的定量分析
技術優勢

技術優勢

同一張組織切片上實現多達7種染色

增強抗體靈敏度達1000倍,節約抗體

擺脫一抗種屬來源束縛,實現抗體自由選擇

組織原位類流式分析

單一細胞多重表達標記實現組織原位觀察

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